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實(shí)時(shí)監(jiān)控活細(xì)胞密度,使用真菌生產(chǎn)治療性蛋白抗體

更新日期:2020-06-03      瀏覽次數(shù):4097

實(shí)時(shí)監(jiān)控活細(xì)胞密度

使用真菌生產(chǎn)治療性蛋白抗體

 

在光合生物反應(yīng)器中在線監(jiān)測(cè)活細(xì)胞密度

行業(yè):生物制藥

應(yīng)用:苔蘚培養(yǎng)的控制

Hamilton產(chǎn)品: Incyte與ArcView控制器

 

 

療性蛋白生產(chǎn)的創(chuàng)新工藝

單克隆抗體(mAbs)與治療性蛋白抗體被認(rèn)為是當(dāng)今重要的生物制藥產(chǎn)品, 制造這樣的產(chǎn)品需要建立穩(wěn)定的可重復(fù)的生產(chǎn)工藝。

 

盡管現(xiàn)有的通過(guò)哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)以獲得產(chǎn)品的工藝表現(xiàn)良好,但是在制藥行業(yè)中依然在尋找新的更簡(jiǎn)便可行的工藝。

 

在本文中來(lái)自德國(guó)的Greenovation公司開(kāi)發(fā)了BryoTechnology技術(shù),一種新一代的,符合cGMP要求的利用苔癬培養(yǎng)進(jìn)行生物藥生產(chǎn)的技術(shù)。

 

這種技術(shù)利用苔蘚的*優(yōu)勢(shì),Physcomitrella苔蘚作為專(zhuān)有植物系統(tǒng)的一部分能夠用來(lái)生產(chǎn)廣泛的生物藥產(chǎn)品。2017年11月,第1種基于苔蘚培養(yǎng)生產(chǎn)的生物藥物成功地完成了臨床I期試驗(yàn)。

 

在所有的生產(chǎn)工藝中(不論傳統(tǒng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞,或者更新穎的苔蘚類(lèi))細(xì)胞生長(zhǎng)速率和產(chǎn)率都是評(píng)價(jià)培養(yǎng)工藝好壞的關(guān)鍵參數(shù)。但是有很多因素(例如光照和營(yíng)養(yǎng)物)都會(huì)影響到苔蘚類(lèi)的培養(yǎng)。

 

因此,一種快速可靠的測(cè)量細(xì)胞密度的方法不論對(duì)于前期的工藝優(yōu)化,以及在后期,保證生產(chǎn)的穩(wěn)定性都是必需的。

 

離線取樣檢測(cè)細(xì)胞密度耗時(shí)很長(zhǎng),并且不能準(zhǔn)確得到反應(yīng)器中苔蘚細(xì)胞濃度。

 

苔蘚在培養(yǎng)過(guò)程中形成菌絲,導(dǎo)致細(xì)胞聚集,沒(méi)有明顯的單個(gè)細(xì)胞,離線測(cè)量數(shù)據(jù)和在線信號(hào)之間很難獲得精確的關(guān)聯(lián),然而實(shí)時(shí)在線的測(cè)量為實(shí)現(xiàn)連續(xù)控制提供了可能性。

 

圖一:采用BryoTechnology技術(shù)生產(chǎn)蛋白的小規(guī)模光合生物反應(yīng)器

 

 

在線細(xì)胞密度的信號(hào)(permittivity)與離線測(cè)量的細(xì)胞干重g/L之間的對(duì)照。當(dāng)然permittivity也可以對(duì)照其他的工藝參數(shù),例如重要營(yíng)養(yǎng)物的濃度,pH,光強(qiáng)度,來(lái)進(jìn)行工藝優(yōu)化。

 

 

在線VCD監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)

圖2展示了在線活細(xì)胞濃度趨勢(shì)與離線獲得總細(xì)胞密度的數(shù)據(jù)。在線與離線數(shù)據(jù)之間顯示良好的相似性。

 

圖二:在線電容數(shù)據(jù)與離線細(xì)胞密度數(shù)據(jù)

 

二者的偏差可能是由于在線測(cè)量的活細(xì)胞密度,而離線測(cè)量的是總的細(xì)胞密度。 測(cè)量方法的確定需要更多批次的實(shí)驗(yàn)。

 

整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程中電容信號(hào)相對(duì)穩(wěn)定,與工藝控制系統(tǒng)的整合實(shí)現(xiàn)可行的自動(dòng)化控制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示電容探頭被成功的應(yīng)用于苔蘚培養(yǎng)的活細(xì)胞濃度實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。

 

 

Incyte 優(yōu)勢(shì) :

 

苔癬培養(yǎng)的工藝中,苔癬生長(zhǎng)過(guò)程,長(zhǎng)時(shí)間準(zhǔn)確穩(wěn)定的

在線測(cè)量

易于安裝,使用簡(jiǎn)單

 

 

 

作者:

Jonas Koch

Michael Müller

Dr. Holger Niederkrüger

Greenovation Biotech GmbH

 

翻譯:

瑞士哈美頓產(chǎn)品專(zhuān)家——王濤

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